熒光檢測濾光片的原理及作用
熒光檢測濾光片是一種用于熒光分析、熒光顯微鏡等領(lǐng)域的光學(xué)元件,它一般由光學(xué)性能優(yōu)良、熱膨脹系數(shù)小的材料如光學(xué)玻璃(如硼硅酸玻璃、石英玻璃等)或熔融石英作為基底,通過在基底上鍍上多層介質(zhì)膜(鍍膜材料:金屬如銀、鋁、金等、金屬氧化物如二氧化硅、二氧化鈦等、氟化物等),這些介質(zhì)膜的厚度和折射率經(jīng)過精密計(jì)算,以實(shí)現(xiàn)對特定波長的光的選擇性透過或反射,經(jīng)過濾光片的各項(xiàng)參數(shù)指標(biāo)進(jìn)行測量后滿足指標(biāo)才算真正的制造完成。
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熒光檢測濾光片的原理
熒光物質(zhì)在吸收特定波長的光(激發(fā)光)后,會發(fā)射出波長較長的光(發(fā)射光)。熒光濾光片就是根據(jù)這個(gè)原理,通過選擇性的透光特性,將激發(fā)光和發(fā)射光分離,從而實(shí)現(xiàn)對熒光信號的檢測。
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熒光檢測濾光片分類
常見的熒光顯微鏡中,由熒光濾光片通常組合成濾光塊。一個(gè)典型的濾光塊包括激發(fā)濾光片、發(fā)射濾光片以及二向色鏡。
激發(fā)濾光片: 透過激發(fā)光,阻擋其他波長的光。
發(fā)射濾光片: 透過發(fā)射光,阻擋激發(fā)光和散射光。
二向色鏡: 將激發(fā)光反射到樣品上,同時(shí)將發(fā)射光透射出去。
熒光檢測濾光片的選用
選擇合適的熒光檢測濾光片,需要考慮以下因素:
熒光染料的激發(fā)和發(fā)射波長:濾光片的透光范圍應(yīng)與熒光染料的激發(fā)和發(fā)射波長相匹配。
背景熒光:濾光片應(yīng)能有效地濾除背景熒光,提高信噪比。
光源: 濾光片的透光范圍應(yīng)與光源的波長范圍相匹配。
熒光檢測濾光片的重要作用
提高信噪比:通過濾除背景光,提高熒光信號的檢測靈敏度。
改善圖像質(zhì)量:獲得清晰、高對比度的熒光圖像。
實(shí)現(xiàn)多色熒光成像:通過組合不同波長的濾光片,可以同時(shí)檢測多種熒光染料。